এনজাইমগুলি সাপের বিষে কার্বক্সিল এস্টার বন্ডে কাজ করে

সাপের বিষে এনজাইম থাকে যা কার্বক্সিল এস্টার বন্ডকে হাইড্রোলাইজ করে।হাইড্রোলাইসিসের জন্য সাবস্ট্রেটগুলি হল ফসফোলিপিড, এসিটাইলকোলিন এবং অ্যারোমেটিক অ্যাসিটেট।এই এনজাইমগুলির মধ্যে তিনটি প্রকার রয়েছে: ফসফোলিপেস, এসিটাইলকোলিনেস্টেরেজ এবং সুগন্ধযুক্ত এস্টেরেজ।সাপের বিষের আর্জিনাইন এস্টেরেজ সিন্থেটিক আর্জিনাইন বা লাইসিনকে হাইড্রোলাইজ করতে পারে, তবে এটি প্রধানত প্রকৃতিতে প্রোটিন পেপটাইড বন্ধনকে হাইড্রোলাইজ করে, তাই এটি প্রোটিজের অন্তর্গত।এখানে আলোচনা করা এনজাইমগুলি শুধুমাত্র এস্টার সাবস্ট্রেটের উপর কাজ করে এবং কোন পেপটাইড বন্ডে কাজ করতে পারে না।এই এনজাইমগুলির মধ্যে, অ্যাসিটাইলকোলিনেস্টেরেজ এবং ফসফোলিপেসের জৈবিক কাজগুলি আরও গুরুত্বপূর্ণ এবং সম্পূর্ণরূপে অধ্যয়ন করা হয়েছে।কিছু সাপের বিষের শক্তিশালী সুগন্ধযুক্ত এস্টেরেজ ক্রিয়াকলাপ রয়েছে, যা পি-নাইট্রোফেনাইল ইথাইল এস্টার, a – বা P-ন্যাপথালিন অ্যাসিটেট এবং ইনডোল ইথাইল এস্টারকে হাইড্রোলাইজ করতে পারে।এটি এখনও অজানা যে এই কার্যকলাপটি একটি স্বাধীন এনজাইম বা কার্বক্সিলেস্টেরেজের একটি পরিচিত পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া দ্বারা উত্পাদিত কিনা, এর জৈবিক তাত্পর্যকে ছেড়ে দিন।যখন অ্যাগকিস্ট্রোডন হ্যালিস জাপোনিকাসের বিষ পি-নাইট্রোফেনাইল ইথাইল এস্টার এবং ইনডোল ইথাইল এস্টারের সাথে বিক্রিয়া করা হয়েছিল, তখন পি-নাইট্রোফেনল এবং ইনডোল ফেনলের হাইড্রোলাইসেট পাওয়া যায়নি;বিপরীতে, যদি এই এস্টারগুলি কোবরা ঝোশান উপ-প্রজাতির সাপের বিষ এবং বুঙ্গারাস মাল্টিসিঙ্কটাস সাপের বিষের সাথে প্রতিক্রিয়া দেখায় তবে তারা দ্রুত হাইড্রোলাইজড হয়ে যাবে।এটা জানা যায় যে এই কোবরা বিষের শক্তিশালী কোলিনস্টেরেজ কার্যকলাপ রয়েছে, যা উপরের স্তরগুলির হাইড্রোলাইসিসের জন্য দায়ী হতে পারে।আসলে, Mclean et al.(1971) রিপোর্ট করেছে যে কোবরা পরিবারের অন্তর্গত অনেক সাপের বিষ ইনডোল ইথাইল এস্টার, ন্যাপথলিন ইথাইল এস্টার এবং বিউটাইল ন্যাপথলিন এস্টারকে হাইড্রোলাইজ করতে পারে।এই সাপের বিষগুলি থেকে এসেছে: কোবরা, ব্ল্যাক নেকড কোবরা, ব্ল্যাক লিপড কোবরা, গোল্ডেন কোবরা, মিশরীয় কোবরা, কিং কোবরা, গোল্ডেন কোবরা মাম্বা, ব্ল্যাক মাম্বা এবং হোয়াইট লিপড মাম্বা (ডি. এউ এখনও ইস্টার্ন রম্বোলা র‍্যাটলস্নেক জানে

সাপের বিষ মিথাইল ইনডোল ইথাইল এস্টারকে হাইড্রোলাইজ করতে পারে, যা সিরামের কোলিনস্টেরেজ কার্যকলাপ নির্ধারণের জন্য সাবস্ট্রেট, কিন্তু এই সাপের বিষ কোলিনস্টেরেজ কার্যকলাপ দেখায় না।এটি দেখায় যে কোবরা বিষে একটি অজানা এস্টেরেজ রয়েছে, যা কোলিনস্টেরেজ থেকে আলাদা।এই এনজাইমের প্রকৃতি বোঝার জন্য, আরও বিচ্ছেদ কাজ প্রয়োজন।

1, ফসফোলাইপেস A2

(I) সংক্ষিপ্ত বিবরণ

ফসফোলিপেস একটি এনজাইম যা গ্লিসারিল ফসফেটকে হাইড্রোলাইজ করতে পারে।প্রকৃতিতে 5 ধরণের ফসফোলিপেস রয়েছে, যথা ফসফোলিপেস A2 এবং ফসফোলিপেস

A. , phospholipase B, phospholipase C এবং phospholipase D. সাপের বিষে প্রধানত ফসফোলিপেস A2 (PLA2) থাকে, কিছু সাপের বিষে ফসফোলিপেস বি থাকে এবং অন্যান্য ফসফোলিপেস প্রধানত প্রাণীর টিস্যু এবং ব্যাকটেরিয়ায় পাওয়া যায়।চিত্র 3-11-4 সাবস্ট্রেট হাইড্রোলাইসিসে এই ফসফোলিপেসের অ্যাকশন সাইট দেখায়।

ফসফোলিপেসেসের মধ্যে, PLA2 আরও অধ্যয়ন করা হয়েছে।এটি হতে পারে সাপের বিষের সবচেয়ে বেশি অধ্যয়ন করা এনজাইম।এর সাবস্ট্রেট হল Sn-3-গ্লিসারোফসফেটের দ্বিতীয় অবস্থানের এস্টার বন্ড।এই এনজাইমটি সাপের বিষ, মৌমাছির বিষ, বৃশ্চিকের বিষ এবং প্রাণীর টিস্যুতে ব্যাপকভাবে পাওয়া যায় এবং PLA2 চারটি পারিবারিক সাপের বিষে প্রচুর পরিমাণে পাওয়া যায়।কারণ এই এনজাইম লোহিত রক্তকণিকা ভেঙ্গে হেমোলাইসিস ঘটায়, একে "হেমোলাইসিন"ও বলা হয়।কিছু লোক PLA2 হেমোলাইটিক লেসিথিনেসও বলে।

লুডিকে প্রথম দেখতে পান যে সাপের বিষ এনজাইমের মাধ্যমে লেসিথিনের উপর কাজ করে একটি হেমোলাইটিক যৌগ তৈরি করতে পারে।পরে, Delezenne et al.প্রমাণিত যে কোবরা বিষ যখন ঘোড়ার সিরাম বা কুসুমের উপর কাজ করে তখন এটি একটি হেমোলাইটিক পদার্থ গঠন করে।এটি এখন জানা যায় যে PLA2 সরাসরি এরিথ্রোসাইট ঝিল্লির ফসফোলিপিডগুলিতে কাজ করতে পারে, এরিথ্রোসাইট ঝিল্লির গঠনকে ধ্বংস করে এবং সরাসরি হেমোলাইসিস ঘটায়;এটি হেমোলাইটিক লেসিথিন তৈরি করতে সিরাম বা যুক্ত লেসিথিনের উপরও কাজ করতে পারে, যা পরোক্ষ হেমোলাইসিস তৈরি করতে লোহিত রক্তকণিকার উপর কাজ করে।যদিও সাপের বিষের চারটি পরিবারে PLA2 প্রচুর পরিমাণে রয়েছে, তবে বিভিন্ন সাপের বিষে এনজাইমের বিষয়বস্তু কিছুটা আলাদা।র‍্যাটলস্নেক (সি

সাপের বিষ শুধুমাত্র দুর্বল PLA2 কার্যকলাপ দেখায়।সারণী 3-11-11 চীনের বিষাক্ত সাপের 10টি প্রধান বিষের PLA2 কার্যকলাপের তুলনা চিত্রিত করে।

সারণী 3-11-11 চীনে 10টি সাপের বিষের ফসফোলিপেস VIII কার্যকলাপের তুলনা

সাপের বিষ

চর্বি মুক্তি

আলিফ্যাটিক অ্যাসিড,

Cjumol/mg)

হেমোলিটিক কার্যকলাপ CHU50/^ g * মিলি)

সাপের বিষ

ফ্যাটি অ্যাসিড ছেড়ে দিন

(^raol/mg)

হেমোলিটিক কার্যকলাপ "(HU50/ftg * 1111)

নাজানাজা অত্র

9. 62

এগারো

মাইক্রোসেফাল ওফিস

পাঁচ পয়েন্ট এক শূন্য

ক্যালিস্পাল্লাস

8. 68

দুই হাজার আটশত

gracilis

V, acutus

7. 56

* * #

ওফিওফ্যাগাস হান্না

তিন পয়েন্ট আট দুই

একশত চল্লিশ

Bnugarus fasctatus

7,56

দুইশত আশি

খ. মাল্টিসিঙ্কটাস

এক পয়েন্ট নয় ছয়

দুইশত আশি

ভাইপার a russelli

সাত পয়েন্ট শূন্য তিন

T, mucrosquamatus

এক পয়েন্ট আট পাঁচ

সিমেনসিস

টি. স্টেজনেগারি

0. 97

（2） বিচ্ছেদ এবং শুদ্ধিকরণ

সাপের বিষে PLA2 এর বিষয়বস্তু বড়, এবং এটি তাপ, অ্যাসিড, ক্ষার এবং ডিনাচুরেন্টের জন্য স্থিতিশীল, যাতে এটি PLA2 কে বিশুদ্ধ করা এবং আলাদা করা সহজ হয়।সাধারণ পদ্ধতি হল প্রথমে অশোধিত বিষের উপর জেল পরিস্রাবণ করা, তারপর আয়ন বিনিময় ক্রোমাটোগ্রাফি করা এবং পরবর্তী ধাপটি পুনরাবৃত্তি করা যেতে পারে।এটি উল্লেখ করা উচিত যে আয়ন-বিনিময় ক্রোমাটোগ্রাফির পরে PLA2 এর ফ্রিজ-শুকানোর ফলে একত্রিত হওয়া উচিত নয়, কারণ ফ্রিজ-শুকানোর প্রক্রিয়াটি প্রায়ই সিস্টেমে আয়নিক শক্তি বৃদ্ধি করে, যা PLA2 এর একত্রীকরণের একটি গুরুত্বপূর্ণ কারণ।উপরের সাধারণ পদ্ধতিগুলি ছাড়াও, নিম্নলিখিত পদ্ধতিগুলিও গ্রহণ করা হয়েছে: ① ওয়েলস এট আল।② PLA2 এর সাবস্ট্রেট অ্যানালগটি অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফির জন্য লিগ্যান্ড হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।এই লিগ্যান্ড Ca2+ এর সাথে সাপের বিষে PLA2 এর সাথে আবদ্ধ হতে পারে।ইডিটিএ বেশিরভাগ ইলুয়েন্ট হিসাবে ব্যবহৃত হয়।Ca2+ মুছে ফেলার পর, PLA2 এবং লিগ্যান্ডের মধ্যে সখ্যতা কমে যায় এবং এটি লিগ্যান্ড থেকে বিচ্ছিন্ন হতে পারে।অন্যরা 30% জৈব দ্রবণ বা 6mol/L ইউরিয়া ব্যবহার করে।③ কার্ডিওটক্সিনে PLA2 ট্রেস অপসারণের জন্য PheiiylSephar0SeCL-4B দিয়ে হাইড্রোফোবিক ক্রোমাটোগ্রাফি করা হয়েছিল।④ অ্যান্টি PLA2 অ্যান্টিবডি PLA2 এ অ্যাফিনিটি ক্রোমাটোগ্রাফি সম্পাদন করতে লিগ্যান্ড হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।

এ পর্যন্ত বিপুল সংখ্যক সাপের বিষ PLAZ শুদ্ধ করা হয়েছে।Tu et al.(1977) তালিকাভুক্ত PLA2 1975 সালের আগে সাপের বিষ থেকে শুদ্ধ হয়েছিল। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, PLA2 বিচ্ছেদ এবং বিশুদ্ধকরণ সম্পর্কে প্রতি বছর প্রচুর নিবন্ধ রিপোর্ট করা হয়েছে।এখানে, আমরা চীনা পণ্ডিতদের দ্বারা পিএলএ-এর বিচ্ছিন্নতা এবং বিশুদ্ধকরণের উপর ফোকাস করি।

চেন ইউয়ানকং এট আল।(1981) ঝেজিয়াংয়ের অ্যাগকিস্ট্রোডন হ্যালিস প্যালাসের বিষ থেকে তিনটি PLA2 প্রজাতিকে পৃথক করেছে, যেগুলিকে তাদের আইসোইলেক্ট্রিক পয়েন্ট অনুসারে অ্যাসিডিক, নিরপেক্ষ এবং ক্ষারীয় PLA2 তে ভাগ করা যেতে পারে।এর বিষাক্ততা অনুসারে, নিরপেক্ষ PLA2 আরও বিষাক্ত, যা প্রিসিন্যাপটিক নিউরোটক্সিন Agkistrodotoxin হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছে।ক্ষারীয় PLA2 কম বিষাক্ত, এবং অম্লীয় PLA2 প্রায় কোন বিষাক্ততা নেই।উ জিয়াংফু এট আল।(1984) আণবিক ওজন, অ্যামিনো অ্যাসিড রচনা, এন-টার্মিনাল, আইসোইলেক্ট্রিক পয়েন্ট, তাপীয় স্থিতিশীলতা, এনজাইম কার্যকলাপ, বিষাক্ততা এবং হেমোলাইটিক কার্যকলাপ সহ তিনটি PLA2 এর বৈশিষ্ট্যগুলির তুলনা করে।ফলাফলগুলি দেখায় যে তাদের অনুরূপ আণবিক ওজন এবং তাপীয় স্থিতিশীলতা ছিল, তবে অন্যান্য দিকগুলিতে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল।এনজাইম কার্যকলাপের দিক থেকে, অ্যাসিড এনজাইমের কার্যকলাপ ক্ষারীয় এনজাইম কার্যকলাপের চেয়ে বেশি ছিল;ইঁদুরের লোহিত রক্তকণিকায় ক্ষারীয় এনজাইমের হেমোলাইটিক প্রভাব ছিল সবচেয়ে শক্তিশালী, তার পরে নিরপেক্ষ এনজাইম এবং অ্যাসিড এনজাইম খুব কমই হেমোলাইজড।অতএব, এটি অনুমান করা হয় যে PLAZ এর হেমোলাইটিক প্রভাব PLA2 অণুর চার্জের সাথে সম্পর্কিত।ঝাং জিংকাং এট আল।(1981) Agkistrodotoxin স্ফটিক তৈরি করেছে।তু গুয়াংলিয়াং এট আল।(1983) রিপোর্ট করেছে যে 7. 6 এর আইসোইলেক্ট্রিক পয়েন্ট সহ একটি বিষাক্ত পিএলএ ফুজিয়ান থেকে ভাইপেরা রোটান্ডাসের বিষ থেকে বিচ্ছিন্ন এবং শুদ্ধ হয়েছিল এবং এর ভৌত ও রাসায়নিক বৈশিষ্ট্য, অ্যামিনো অ্যাসিড গঠন এবং 22টি অ্যামিনো অ্যাসিডের অবশিষ্টাংশের ক্রম। - টার্মিনাল নির্ধারণ করা হয়েছিল।লি ইউশেং এট আল।(1985) ফুজিয়ানের ভাইপার রোটান্ডাসের বিষ থেকে আরেকটি PLA2 বিচ্ছিন্ন ও বিশুদ্ধ করেছে।PLA2 * এর সাবইউনিট হল 13 800, আইসোইলেকট্রিক পয়েন্ট হল 10.4, এবং নির্দিষ্ট কার্যকলাপ হল 35/xnioI/miri mg. লেসিথিন সাবস্ট্রেট হিসাবে, এনজাইমের সর্বোত্তম pH হল 8.0 এবং সর্বোত্তম তাপমাত্রা হল 65 ° C LD5 ইঁদুরের শিরায় ইনজেকশন দেওয়া হয়।এটি 0.5 ± 0.12 মিগ্রা/কেজি।এই এনজাইমের সুস্পষ্ট anticoagulant এবং hemolytic প্রভাব আছে।বিষাক্ত PLA2 অণুতে 18 ধরনের অ্যামিনো অ্যাসিডের 123টি অবশিষ্টাংশ থাকে।অণুটি সিস্টাইন (14), অ্যাসপার্টিক অ্যাসিড (14) এবং গ্লাইসিন (12) সমৃদ্ধ, তবে এতে শুধুমাত্র একটি মেথিওনিন রয়েছে এবং এর এন-টার্মিনাল হল সেরিন অবশিষ্টাংশ।Tuguang দ্বারা বিচ্ছিন্ন PLA2-এর সাথে তুলনা করলে, দুটি আইসোএনজাইমের আণবিক ওজন এবং অ্যামিনো অ্যাসিডের অবশিষ্টাংশের সংখ্যা খুব একই রকম, এবং অ্যামিনো অ্যাসিডের গঠনও খুব একই রকম, তবে অ্যাসপার্টিক অ্যাসিড এবং প্রোলিনের অবশিষ্টাংশের সংখ্যা কিছুটা আলাদা।গুয়াংজি কিং কোবরা সাপের বিষে সমৃদ্ধ PLA2 রয়েছে।শু ইউয়ান এট আল।(1989) বিষ থেকে একটি PLA2 বিচ্ছিন্ন করে, যার একটি নির্দিষ্ট কার্যকলাপ মূল বিষের চেয়ে 3.6 গুণ বেশি, একটি আণবিক ওজন 13000, 122টি অ্যামিনো অ্যাসিড অবশিষ্টাংশের একটি রচনা, 8.9 একটি আইসোইলেক্ট্রিক পয়েন্ট এবং ভাল তাপীয় স্থিতিশীলতা রয়েছে।লোহিত রক্তকণিকার উপর মৌলিক PLA2 এর প্রভাবের ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ পর্যবেক্ষণ থেকে দেখা যায় যে এটি মানুষের লোহিত রক্তকণিকা ঝিল্লির উপর সুস্পষ্ট প্রভাব ফেলে, কিন্তু ছাগলের লাল রক্ত ​​কণিকার উপর এর কোন সুস্পষ্ট প্রভাব নেই।মানুষ, ছাগল, খরগোশ এবং গিনিপিগের লোহিত রক্তকণিকার ইলেক্ট্রোফোরেটিক গতিতে এই PLA2 এর সুস্পষ্ট প্রতিবন্ধকতা রয়েছে।চেন এট আল।এই এনজাইমটি ADP, কোলাজেন এবং সোডিয়াম অ্যারাকিডোনিক অ্যাসিড দ্বারা প্ররোচিত প্লেটলেট একত্রিতকরণকে বাধা দিতে পারে।যখন PLA2 ঘনত্ব 10/xg/ml~lOOjug/ml হয়, তখন প্লেটলেট একত্রিতকরণ সম্পূর্ণরূপে বাধাপ্রাপ্ত হয়।যদি ধোয়া প্লেটলেটগুলি উপকরণ হিসাবে ব্যবহার করা হয় তবে PLA2 20Mg/ml ঘনত্বে একত্রিতকরণকে বাধা দিতে পারে না।অ্যাসপিরিন হল সাইক্লোক্সিজেনেসের একটি প্রতিরোধক, যা প্লেটলেটগুলিতে PLA2 এর প্রভাবকে বাধা দিতে পারে।PLA2 থ্রোমবক্সেন A2 সংশ্লেষিত করার জন্য অ্যারাকিডোনিক অ্যাসিড হাইড্রোলাইজ করে প্লেটলেট একত্রিতকরণকে বাধা দিতে পারে।ঝেজিয়াং প্রদেশে অ্যাগকিস্ট্রোডন হ্যালিস প্যালাস ভেনম দ্বারা উত্পাদিত PLA2-এর সমাধান কনফর্মেশন বৃত্তাকার ডাইক্রোইজম, ফ্লুরোসেন্স এবং ইউভি শোষণের মাধ্যমে অধ্যয়ন করা হয়েছিল।পরীক্ষামূলক ফলাফলগুলি দেখায় যে এই এনজাইমের মূল চেইন কনফর্মেশন অন্যান্য প্রজাতি এবং জেনারার একই ধরণের এনজাইমের মতো ছিল, কঙ্কালের গঠনটি ভাল তাপ প্রতিরোধের ছিল এবং অ্যাসিড পরিবেশে কাঠামোগত পরিবর্তন বিপরীতমুখী ছিল।অ্যাক্টিভেটর Ca2+ এবং এনজাইমের সংমিশ্রণ ট্রিপটোফান অবশিষ্টাংশের পরিবেশকে প্রভাবিত করে না, যখন ইনহিবিটর Zn2+ বিপরীতটি করে।যেভাবে দ্রবণের pH মান এনজাইমের কার্যকলাপকে প্রভাবিত করে তা উপরের বিকারকগুলির থেকে আলাদা।

সাপের বিষের PLA2 পরিশোধনের প্রক্রিয়ায়, একটি সুস্পষ্ট ঘটনা হল যে একটি সাপের বিষে দুটি বা ততোধিক PLA2 ইলুশন পিক থাকে।এই ঘটনাটি নিম্নরূপ ব্যাখ্যা করা যেতে পারে: ① আইসোজাইমের অস্তিত্বের কারণে;② এক ধরণের PLA2 বিভিন্ন আণবিক ওজন সহ বিভিন্ন PLA2 মিশ্রণে পলিমারাইজ করা হয়, যার বেশিরভাগই 9 000~ 40 000 এর মধ্যে;③ PLA2 এবং অন্যান্য সাপের বিষের উপাদানগুলির সংমিশ্রণ PLA2 কে জটিল করে তোলে;④ যেহেতু PLA2-এ অ্যামাইড বন্ড হাইড্রোলাইজড, চার্জ পরিবর্তিত হয়।① এবং ② সাধারণ, শুধুমাত্র কয়েকটি ব্যতিক্রম সহ, যেমন CrWa/w সাপের বিষে PLA2

দুটি অবস্থা আছে: ① এবং ②।নিম্নলিখিত সাপের বিষের মধ্যে PLA2-এ তৃতীয় অবস্থা পাওয়া গেছে: অক্সিরানাস স্কুটেলাটাস, প্যারাডেম্যানসিয়া মাইক্রোলেপিডোটা, বোথ্রপস এ ^>র, প্যালেস্টাইন ভাইপার, স্যান্ড ভাইপার এবং ভয়ানক র‍্যাটলস্নেক কিমি।

কেসের ফলাফল ④ ইলেক্ট্রোফোরেসিসের সময় PLA2 এর স্থানান্তর গতি পরিবর্তন করে, কিন্তু অ্যামিনো অ্যাসিডের গঠন পরিবর্তন হয় না।পেপটাইডগুলি হাইড্রোলাইসিস দ্বারা ভাঙ্গা যেতে পারে, তবে সাধারণত তারা এখনও ডিসালফাইড বন্ড দ্বারা একসাথে আবদ্ধ থাকে।ইস্টার্ন পিট র‍্যাটলস্নেকের বিষে PLA2 এর দুটি রূপ রয়েছে, যথাক্রমে টাইপ a এবং টাইপ p PLA2।এই দুই ধরনের PLA2 এর মধ্যে পার্থক্য হল শুধুমাত্র একটি অ্যামিনো অ্যাসিড, অর্থাৎ একটি PLA2 অণুর গ্লুটামিন অন্য PLA2 অণুতে গ্লুটামিক অ্যাসিড দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়।যদিও এই পার্থক্যের সঠিক কারণ স্পষ্ট নয়, তবে এটি সাধারণত বিশ্বাস করা হয় যে এটি PLA2 এর ডিমিনেশনের সাথে সম্পর্কিত।যদি ফিলিস্তিনের ভাইপার বিষের PLA2 কে অপরিশোধিত বিষের সাথে উষ্ণ রাখা হয়, তবে এর এনজাইম অণুর শেষ গ্রুপগুলি আগের চেয়ে বেশি হয়ে যাবে।সাপের বিষ থেকে বিচ্ছিন্ন C PLA2 এর দুটি ভিন্ন এন-টার্মিনাল রয়েছে এবং এর আণবিক ওজন 30000। এই ঘটনাটি PLA2 এর অপ্রতিসম ডাইমারের কারণে ঘটতে পারে, যা পূর্ব ডায়মন্ডব্যাক র্যাটলস্নাকের বিষে PLA2 দ্বারা গঠিত সিমেট্রিক ডাইমারের অনুরূপ। এবং ওয়েস্টার্ন ডায়মন্ডব্যাক র‍্যাটলস্নেক।এশিয়ান কোবরা অনেক উপ-প্রজাতির সমন্বয়ে গঠিত, যার মধ্যে কয়েকটি শ্রেণীবিভাগে খুব নির্দিষ্ট নয়।উদাহরণস্বরূপ, কোবরা আউটার ক্যাস্পিয়ান উপ-প্রজাতি এখন স্বীকৃত

এটি আউটার ক্যাস্পিয়ান সাগর কোবরাকে দায়ী করা উচিত।যেহেতু অনেকগুলি উপ-প্রজাতি রয়েছে এবং সেগুলি একসাথে মিশ্রিত হয়, বিভিন্ন উত্সের কারণে সাপের বিষের গঠন ব্যাপকভাবে পরিবর্তিত হয় এবং PLA2 আইসোজাইমের বিষয়বস্তুও বেশি।উদাহরণস্বরূপ, কোবরা বিষ

r^ll প্রজাতির অন্তত 9 ধরনের PLA2 আইসোজাইম পাওয়া গেছে, এবং 7 ধরনের PLA2 আইসোজাইম কোবরা উপ-প্রজাতি ক্যাস্পিয়ানের বিষে পাওয়া গেছে।ডারকিন এট আল।(1981) 18টি কোবরা বিষ, 3টি মাম্বা বিষ, 5টি ভাইপার বিষ, 16টি র‍্যাটলস্নেক বিষ এবং 3টি সামুদ্রিক সাপের বিষ সহ বিভিন্ন সাপের বিষে PLA2 বিষয়বস্তু এবং আইসোজাইমের সংখ্যা অধ্যয়ন করেছে।সাধারণভাবে, অনেক আইসোজাইম সহ কোবরা বিষের PLA2 কার্যকলাপ বেশি।ভাইপার বিষের PLA2 কার্যকলাপ এবং আইসোজাইমগুলি মাঝারি।মাম্বা ভেনম এবং র‍্যাটলস্নেক বিষের PLA2 কার্যকলাপ খুবই কম বা PLA2 কার্যকলাপ নেই।সামুদ্রিক সাপের বিষের PLA2 কার্যকলাপও কম।

সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, এটি রিপোর্ট করা হয়নি যে সাপের বিষে PLA2 সক্রিয় ডাইমার আকারে বিদ্যমান, যেমন ইস্টার্ন রম্বোফোরা র‍্যাটলস্নেক (সি. সাপের বিষে টাইপ a এবং টাইপ P PLA2 রয়েছে, উভয়ই দুটি অভিন্ন সাবুনিটের সমন্বয়ে গঠিত। , এবং শুধুমাত্র dimerase আছে

কার্যকলাপশেন এট আল।এছাড়াও প্রস্তাব করেছেন যে সাপের বিষের PLA2 এর শুধুমাত্র ডাইমার এনজাইমের সক্রিয় রূপ।স্থানিক কাঠামোর অধ্যয়নও প্রমাণ করে যে ওয়েস্টার্ন ডায়মন্ডব্যাক র‍্যাটলস্নেকের PLA2 ডাইমার আকারে বিদ্যমান।মীনভোজী যৌগ

সাপের বিষের দুটি ভিন্ন PLA ^ Ei এবং E2 রয়েছে, যেখানে 仏 ডাইমার আকারে বিদ্যমান, ডাইমার সক্রিয় এবং এর বিচ্ছিন্ন মনোমার নিষ্ক্রিয়।লু ইংহুয়া এট আল।(1980) আরও ই. জয়ন্তী এট আল-এর ভৌত ও রাসায়নিক বৈশিষ্ট্য এবং প্রতিক্রিয়া গতিবিদ্যা অধ্যয়ন করেছে।(1989) ভাইপার বিষ থেকে একটি মৌলিক PLA2 (VRVPL-V) বিচ্ছিন্ন করেছে।মনোমার PLA2-এর আণবিক ওজন 10000, এতে প্রাণঘাতী, অ্যান্টিকোয়াগুল্যান্ট এবং শোথ প্রভাব রয়েছে।এনজাইম PH 4.8 শর্তে বিভিন্ন আণবিক ওজন সহ পলিমারগুলিকে পলিমারাইজ করতে পারে এবং তাপমাত্রা বৃদ্ধির সাথে পলিমারের পলিমারাইজেশন এবং আণবিক ওজন বৃদ্ধি পায়।96 ° C এ উত্পন্ন পলিমারের আণবিক ওজন হল 53 100, এবং এই পলিমারের PLA2 কার্যকলাপ দুই দ্বারা বৃদ্ধি পায়